一、 溶出度測(cè)量方法
 
1.1轉(zhuǎn)籃法    籃法是通過(guò)固定制劑的位置過(guò)的盡可能重現(xiàn)的液-固接觸層。不足之處如制劑中的黏性物質(zhì)容易堵塞篩網(wǎng)；對(duì)溶出介質(zhì)中溶解氣體極其敏感以及當(dāng)顆粒逸出網(wǎng)籃并浮在溶出介質(zhì)中時(shí)會(huì)造成流蘇的變動(dòng); 另外在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)籃法還存在著一個(gè)較為實(shí)際的問(wèn)題: 例如籃內(nèi)裝得較滿時(shí)，在儀器轉(zhuǎn)動(dòng)過(guò)程中僅僅可以能使釋放的介質(zhì)與籃外層的部分相接觸，所以就常常不能較為客觀地反映出溶出規(guī)律。
1.2槳法   此方法克服了籃法的諸多不足。但是該方法對(duì)攪拌槳和溶出杯幾何尺寸的精度有相當(dāng)高的要求，攪拌槳運(yùn)動(dòng)方向的微小改變都會(huì)引起溶出結(jié)果的變動(dòng)，而這些結(jié)果的變動(dòng)是可接受的。漿法具有極易導(dǎo)致樣品上浮的缺點(diǎn)。
1.3往復(fù)筒法   1995 年 USP 23 版收載了該法( 第3 法) ，應(yīng)用于緩釋制劑，特別是小丸( 或微丸) 制劑的釋放度檢查。該儀器裝置采用兩端裝有篩網(wǎng)的透明中空?qǐng)A筒。將樣品置于圓筒中并將兩端篩網(wǎng)緊固后，該裝置在置于水浴中并內(nèi)裝有溶出介質(zhì)的玻璃管中輕輕上下往復(fù)，解聚后的顆粒“懸浮”在往復(fù)運(yùn)動(dòng)的液流中。為部分模擬人體胃腸道環(huán)境，可用于存放不同 pH 介質(zhì)的一系列玻璃管作為溶出杯。往復(fù)筒法的優(yōu)點(diǎn)是所需介質(zhì)少，易于改變 pH、減少死時(shí)間以及避免降解等。用于緩控釋制劑溶出檢查。該儀器通常被稱(chēng)為“Bio-Dis”，目前，Varian 和 Erwe-ka 等廠商提供了此種儀器。
1.4流池法( flow-through apparatus)   該方法就是將制劑置于樣品池中，溶出介質(zhì)在泵壓下通過(guò)流通池。該方法已經(jīng)列入 USP36 版的第 4 法和《歐洲藥典》( 第七版) 的官方標(biāo)準(zhǔn)，可用于籃法和槳法中有飽和度問(wèn)題的藥物。用于片劑和包衣片、栓劑、軟膠囊、植入劑、微膠囊、粉末和顆粒等制劑溶出速率的測(cè)定。特別適用于緩釋制劑的檢測(cè)以及需要改變介質(zhì) pH 的溶出或釋放度的分析，還可為難溶性藥物提供恒定的漏槽條件。該方法具有與自動(dòng)取樣技術(shù)的天然適配性。
二、影響溶出度結(jié)果的因素
2.1與流體動(dòng)力學(xué)相關(guān)的因素 溶出介質(zhì)在攪拌過(guò)程中的流體動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的變化主要包括溶入介質(zhì)中的氣體、攪拌裝置位置、攪拌速度等變化。介質(zhì)中溶入的氣體在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能會(huì)形成小氣泡聚集在容器邊，攪拌旋轉(zhuǎn)軸表面和固體制劑的表面。若氣泡聚集在固體制劑的表面會(huì)使它們浮起或者阻止其與介質(zhì)接觸，從而會(huì)影響溶出結(jié)果。所以溶出介質(zhì)必須經(jīng)脫氣處理。溶出度儀需要保持水平、攪拌元件保證垂直，并與溶出杯的軸線間的偏離要小于 ±2 mm，否則會(huì)嚴(yán)重干擾流型，使溶出數(shù)據(jù)增加。轉(zhuǎn)速的變化與溶出速率之間基本是線性關(guān)系。同時(shí)，要求運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)整套裝置保持平穩(wěn)，均不能產(chǎn)生明顯的晃動(dòng)或振動(dòng)( 包括裝置所處的環(huán)境) ，并以低攪拌為好，以便接近體內(nèi)情況。
2.2樣品取樣 取樣時(shí)間應(yīng)按照品種各論中規(guī)定的取樣時(shí)間取樣。取樣的位置應(yīng)在槳葉頂端**頁(yè)面的中點(diǎn)，距溶出杯內(nèi)壁 6 mm 處，原因是從藥物開(kāi)始溶解到溶出完全，出現(xiàn)濃度梯度，濃度梯度與攪拌速度成反比，在靠近未溶解藥處，溶解了的藥物濃度**高，在攪拌較弱的地方濃度**低。因此，應(yīng)避免在兩個(gè)極端取樣。取樣時(shí)間對(duì)于速釋制劑，試驗(yàn)時(shí)間通常為 30 或60 min，采取單點(diǎn)取樣的方式。緩釋制劑通常需要**少 3 個(gè)取樣點(diǎn)。通過(guò)溶出度均一性試驗(yàn)( 考察同一批樣品的溶出曲線) 和重現(xiàn)性試驗(yàn)( 考察**少 3批樣品的溶出曲線) ，確定合理的溶出度測(cè)定取樣點(diǎn)和限度。為避免多次取樣造成的誤差，測(cè)定溶出曲線時(shí)取樣點(diǎn)不宜過(guò)多，通常為 5~6 個(gè)點(diǎn)，小規(guī)格的制劑因采用 100~250 mL 溶出介質(zhì)，所以溶出曲線一般可選 3~4 個(gè)時(shí)間點(diǎn)。限度應(yīng)綜合考慮溶出曲線拐點(diǎn)和一般性要求。
2.3溶出介質(zhì) 溶出介質(zhì)是根據(jù)樣品的溶解度數(shù)據(jù)和劑量范圍進(jìn)行選擇的，以滿足漏槽條件，漏槽條件規(guī)定溶出介質(zhì)的體積不能少于主藥形成飽和溶液所需體積的3倍量。溶出度檢查中溶出介質(zhì)**多使用的是水，其次是0.1mol·L-1鹽酸、緩沖液( pH 3~8) 、人工胃液或人工腸液。如果溶出介質(zhì)為鹽酸溶液等酸溶液，必須在水脫氣后冷卻**約 37 ℃時(shí)配制，若先配制再加熱脫氣，就會(huì)影響酸度; 若溶出介質(zhì)中含有有機(jī)溶劑，應(yīng)在脫氣后配制; 若溶出介質(zhì)為緩沖液，應(yīng)調(diào)節(jié) pH **規(guī)定值 ±0.05之內(nèi)。溶出介質(zhì)的體積需使藥物符合漏槽條件，一般一個(gè)劑量單位以溶劑900或1000mL為**普遍，規(guī)格較小時(shí)也可使用常用體積的1/2~3/4。
溶出介質(zhì)中常用的無(wú)機(jī)鹽或有機(jī)溶劑(乙醇或異丙醇等) 不同廠商的差異不明顯，但是，在試驗(yàn)中必須用到的水，因?yàn)閬?lái)源( 如采用的純化方式和過(guò)程) 不同，水的純度和 pH 值等指標(biāo)可能存在差異，對(duì)某些品種的溶出度測(cè)定可能會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的出現(xiàn)差異。
2.4轉(zhuǎn)速 各G藥典中收載的溶出度測(cè)定方法中的轉(zhuǎn)速，大部分在50~100 r·min-1。轉(zhuǎn)籃法以 100r·min-1為主; 槳法以 50 r·min-1為主。一般認(rèn)為槳法50 r·min-1相當(dāng)于轉(zhuǎn)籃法 100 r·min-1。轉(zhuǎn)速的設(shè)置與具體品種有關(guān)，通常，藥物制劑的溶出速度隨著轉(zhuǎn)速的增加而增大。轉(zhuǎn)速過(guò)快，可能會(huì)導(dǎo)致對(duì)不同制劑溶出行為的區(qū)分能力差，所以不推薦選擇過(guò)高轉(zhuǎn)速。轉(zhuǎn)速的選擇應(yīng)以能區(qū)分不同處方和生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品為宜，如確實(shí)需要選擇高轉(zhuǎn)速，應(yīng)進(jìn)行充分的驗(yàn)證。
2.5濾膜吸附情況的考察 在溶出度測(cè)定中，為保證得到澄清的溶液，溶出液通常需要經(jīng)過(guò)濾膜濾過(guò)。試驗(yàn)所用濾膜應(yīng)該是惰性的，不能明顯吸附溶出液中的有效成分，也不能被溶出介質(zhì)溶出而干擾測(cè)定的物質(zhì)。因此在溶出度研究時(shí)，一定要shou先考察試驗(yàn)所用濾膜對(duì)主成分是否有吸附。中G藥典 2010年版附錄中溶出度測(cè)定法對(duì)微孔濾膜的規(guī)定為“濾孔應(yīng)不大于0.8um，并使用惰性材料制成的濾器，以免吸附活性成分或干擾分析測(cè)定”。判定吸附與否的方法可采用: ① 取溶出液過(guò)濾，舍去不同體積的初濾液后測(cè)定，觀察響應(yīng)值的變化，了解被測(cè)藥物與濾膜的吸附情況。② 取樣后，一部分不過(guò)濾,直接采用高速離心，取上清液測(cè)定。另一部分采用過(guò)濾法，取所得的續(xù)濾液測(cè)定，考察兩者間測(cè)定數(shù)據(jù)的差異。③ 取對(duì)照品溶液，經(jīng)濾膜過(guò)濾后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測(cè)定前后數(shù)據(jù)的變化。發(fā)生吸附的品種往往是難溶性藥物，制成制劑時(shí)一般需進(jìn)行微粉化等處理，使原料藥粒徑變小，比表面能變大，靜電吸附能力增強(qiáng)，故與濾膜的吸附作用明顯; 一些小規(guī)格制劑(如左炔諾孕酮片) 溶出液中藥物濃度很低，達(dá)到飽和所需的初濾液體積大大增加，干擾也較大。一般認(rèn)為吸附量在 2% 以下時(shí)可忽略不計(jì)，超過(guò) 2%建議或在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中明確注明濾膜規(guī)格或?yàn)V膜預(yù)處理方法(如煮沸1.5h) 、增加初濾液量( 常規(guī)為5mL) 或規(guī)定樣品高速離心后取上清液測(cè)定。
三、溶出度的測(cè)定方法
溶出度試驗(yàn)中溶出度量的測(cè)定和計(jì)算是一個(gè)重要的環(huán)節(jié)，相對(duì)于早期的容量分析法以及比色法，現(xiàn)在使用**多的為紫外分光光度法和高效液相色譜法。紫外分光光度法操作簡(jiǎn)單，儀器也容易得到，高效液相色譜法比其他方法專(zhuān)屬性強(qiáng)，測(cè)定的結(jié)果更精確，目前越來(lái)越多的新批復(fù)的藥物都是用高效液相色譜法測(cè)定溶出量。
四、溶出度儀的發(fā)展
目前，市場(chǎng)上所銷(xiāo)售的溶出度測(cè)定儀主要有:HTY2EU802 藥 物 溶 出 儀; 智 能 六 杯 溶 出 儀RCZ26B2; RCY28 型 智 能 藥 物 溶 出 度 測(cè) 定 儀;HTY2DS803 溶出自動(dòng)取樣系統(tǒng); ZRC-6D，ZRC-8D，ZRC-6FT，ZRC-6ST，ZRC-8FT，ZRC-3，RC-3，RC-6，RC-8 等型智能溶出度測(cè)定儀，上述溶出度測(cè)定儀基本上都是基于轉(zhuǎn)漿法或轉(zhuǎn)籃法而設(shè)計(jì)，而根據(jù)溶解裝置的不同，檢查方法可有槳狀攪拌器法、轉(zhuǎn)籃法、流通池法、槳碟法、中池法、轉(zhuǎn)筒法和小杯法等。
隨著分析科學(xué)的發(fā)展，以“取樣分析”為代表的分析模式正在逐步發(fā)展為在線過(guò)程分析，其原因主要是“取樣分析”的模式具有人工取樣誤差、操作繁瑣以及會(huì)破壞樣品等缺點(diǎn)?；诖它c(diǎn)，瑞士、美、德、英等多家公司推出了藥物溶出儀蠕動(dòng)泵 + 檢測(cè)儀的在線過(guò)程分析儀，蠕動(dòng)泵將試液循環(huán)送入監(jiān)測(cè)器，實(shí)現(xiàn)在線自動(dòng)分析，但是此類(lèi)儀器存在管道吸附，洗滌困難以及數(shù)據(jù)滯后等問(wèn)題，未能普及和推廣。1990年，美G漢森、德G Pharma Test 和中G新疆醫(yī)科大學(xué)相繼進(jìn)行光纖藥物溶出度原位過(guò)程監(jiān)測(cè)儀的研發(fā)，實(shí)現(xiàn)了藥物溶出度的原位、實(shí)時(shí)、過(guò)程分析。